走进南宫28

NEWS

南宫28助力高活性蛋白质研究的TurboTEV蛋白酶

来源:令狐霭婵 日期:2025-03-31

南宫28的TurboTEV蛋白酶是一种经过强化的半胱氨酸蛋白酶,源自烟草蚀刻病毒(TEV)N1a蛋白的催化片段。它特异性地切割位点为Glu-Asn-Leu-Tyr-Phe-Gln-Gly,并在Gln和Gly之间进行切割。这款蛋白酶在4°C下保持强活性,展现出优越的特异性和稳定性,且无需特定缓冲液,可以与目标蛋白最匹配的缓冲液配合使用。

南宫28助力高活性蛋白质研究的TurboTEV蛋白酶

TurboTEV蛋白酶的分子量为52kDa,设计有GST和His标签,便于通过Ni螯合或谷胱甘肽(GSH)树脂轻松去除标签。其活性来源于大肠杆菌,活性超过10单位/µg,能够在30°C下1小时内裂解3µg底物的85%。

南宫28的TurboTEV蛋白酶操作步骤如下:

  1. 裂解步骤:
    1. 制备新鲜的冰冷透析缓冲液,示例配方:25mM Tris-HCl(pH 8.0),150-500mM NaCl,14mM β-巯基乙醇。
    2. 用透析缓冲液将目标蛋白稀释至1-2 mg/mL。如有聚集可选择不进行此步骤,并保留一小份未切割样品分析。若从镍柱洗脱,并兼容EDTA,可加入EDTA至0.5mM。
    3. 按1:100(w/w)的比例添加TurboTEV蛋白酶,即100mg目标蛋白对应10000单位(1mg)的TurboTEV蛋白酶。
    4. 在4°C条件下透析过夜(约16小时)。
  2. 去除TurboTEV蛋白酶:上柱进行分离。
  3. SDS-PAGE分析(可选):根据需要进行分析。

TurboTEV蛋白酶的应用包括:

  • 蛋白裂解功能
  • 从重组蛋白中去除融合标签
  • 蛋白质和肽的纯化

南宫28还提供专业的技术支持与服务以优化蛋白质的纯化和功能分析。使用TurboTEV蛋白酶时,应注意以下几点:

  • 反应缓冲液的重要性:推荐使用25mM Tris-HCl(pH 8.0),150mM NaCl和14mM β-巯基乙醇,避免使用DTT、甘油及过高浓度离子。
  • 缓冲液交换:在剪切之前可能需要对蛋白质进行缓冲液交换。

更多研究和应用可参考相关文献,以促进对南宫28 TurboTEV蛋白酶的深入了解及应用开发。

上一篇:南宫28:CGT药物研发的IND到BLA监管提交准备攻略下一篇:南宫28:CGT药物研发的IND到BLA监管准备指南

全国客户服务热线
13796697644 总部地址:石家庄高坪区宗街道75号

欢迎关注南宫28官方微信或拨打客服电话详询!

  

南宫28官方微信