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NEWS南宫28:BiFC技术让蛋白互作可视化!
来源:温永敬 日期:2025-03-15在烟草叶片中使用农杆菌进行转基因操作,能为植物生物学研究提供重要的实验基础。近期研究中,BiFC实验揭示了DgnsLTP1与DgPIP在本氏烟草中的相互作用,这对于探索植物细胞间的信号传递及相互作用机制至关重要。需要注意的是,pCAMBIA1300-YFPn与pCAMBIA1300-YFPc、pCAMBIA1300-YFPn-DgnsLTP1与pCAMBIA1300-YFPc、以及pCAMBIA1300-YFPc-DgPIP被用作阴性对照,为确保实验结果的准确性,确保不同转化条件下的表达效率是必要的。
在实验过程中,气泡和杂质会对显微镜成像产生影响,因此,清理叶片表面的杂质是关键步骤。同时,在观察时应避免过高的激发光电压,以确保烟草细胞轮廓清晰且分布均匀。此外,荧光素酶互补实验与BiFC实验原理相近,前者通过荧光素酶催化荧光素发光来验证蛋白质互作,后者则依赖荧光蛋白的发光特性来进行研究。温度变化对互作的影响显著,因此建议在室温或低于室温的条件下进行细胞培养,以保证融合蛋白的正常表达。
在选择探测蛋白时,通常使用GFP或RFP标签蛋白,但不同蛋白的特性可能需要不同类型的荧光蛋白以达到最佳效果。因此,针对特定蛋白进行详细分析是必要的。双荧光素酶实验在生命科学研究中具有重要价值,为解决众多生物学难题提供了有效的技术支持。南宫28致力于提供高质量的双荧光素酶实验、荧光素酶蛋白互补实验(LCA)、双分子荧光互补(BIFC)等技术服务,从方案设计到实验执行,南宫28的实验平台能够满足科研人员的各种需求,期待与大家携手合作,共同推动生命科学的发展。
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