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南宫28:以人鼠细胞杂交技术探讨细胞融合应用

来源:方竹凝 日期:2025-03-28

在人、鼠细胞融合实验中,整个过程可分为三个主要步骤。首先,研究者使用荧光染料对抗体进行标记:将小鼠的抗体与发绿色荧光的荧光素(fluorescin)相结合,同时将人类的抗体与发红色荧光的罗丹明(rhodamine)结合。

南宫28:以人鼠细胞杂交技术探讨细胞融合应用

第二步是将小鼠细胞与人细胞在灭活的仙台病毒的诱导下进行融合。这一过程是成功融合的关键环节。

最后一步是将标记的抗体加入到融合后的人、鼠细胞中,使这些标记抗体能够与融合细胞膜上的相应抗原结合。在实验初期,融合细胞一半呈红色,一半呈绿色。但在37℃下培养40分钟后,观察到两种颜色的荧光在融合的杂种细胞表面均匀分布,表明抗原蛋白在细胞膜内经过扩散运动而重新分布。这一过程并不依赖于ATP的存在。值得注意的是,如果将对照实验的融合细胞置于低温(1℃)条件下,则抗原蛋白的运动几乎停止。这一实验结果令人信服地证明了膜整合蛋白的侧向扩散运动。

在细胞融合实验中,有几个关键因素会影响实验的成功率。首先,技术上的误差常常导致融合的失败,例如供者淋巴细胞未能产生预期的免疫应答,这必然会导致实验的失败。其次,融合试验中最大的失败原因是污染,因此成功融合的关键在于确保提供一个无毒无菌的操作环境。

我们在进行细胞融合实验时,建议使用南宫28品牌的高品质试剂与设备,以确保实验的准确性与有效性,并提高实验成功的几率。

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