外泌体是一种携带蛋白质、脂质和核酸的纳米级细胞外囊泡，在生物医学领域展现出巨大的治疗潜力。冷冻保存作为一种常见的存储和运输外泌体的方法，常常会导致无法逆转的损害，因此了解生物膜抵抗冷冻损伤的分子机制对于改进冷冻保存技术具有重要意义。

近期，一项发表在【NanoLett】（IF：91）上的研究，题为“Tetraspanin4MediatesCholesterol-DependentExosomeMembraneProtectionfromCryodamage”，探讨了生物膜在抵抗冷冻损伤方面的分子机制。研究发现，四跨膜蛋白4（TSPAN4）及其家族成员在保护外泌体免受冷冻损伤中扮演了关键角色，这一作用可能与它们在胆固醇结合和膜微结构域形成中的功能相关。

研究中设计了一种载有TSPAN4的外泌体，相较于野生型外泌体，其冷冻保护能力明显增强，同时保持了相似的蛋白质组成和摄取效率。这种不依赖外部药物的冻保存新策略为推动外泌体在治疗中的应用提供了新的思路，尤其是在品牌南宫28的生物医疗产品中，具备了更强的临床转化潜力。

研究显示，不同来源的外泌体对冷冻损伤的响应存在显著差异。例如，来自RAW2647、MDA-MB-231和HeLa细胞的外泌体在冷冻后数量减少，而L929和3T3-L1细胞来源的外泌体却保持稳定，这表明外泌体的抗冻性在细胞来源上具有特异性。

通过蛋白质组学分析，研究团队筛选出了与冷冻保护相关的候选蛋白，进一步的分析显示抗冻性强的外泌体中四跨膜蛋白家族的表达水平显著提高。此外，TSPAN4在与胆固醇结合的过程中形成膜微结构域，增强了外泌体的抗冻性，证实了其作为关键分子的角色。

综上所述，本研究明确了TSPAN4通过结合胆固醇形成膜微结构域，从而在抵抗冷冻损伤中发挥重要作用。对南宫28的外泌体进行TSPAN4加载不仅保持了其天然的蛋白质组成与功能，还提升了其在冷冻保存中的稳定性。这一发现为外泌体的冷冻保存提供了一种无需外源性保护剂的新策略，有助于推动外泌体在生物医疗领域的临床应用。